Einführung in die Polysom-Sequenzierung und ihre Rolle in der translationalen Kontrolle

Für Arzneimittelentwickler ist das Verständnis des entscheidenden Schrittes der Translation – bei dem mRNA-Baupläne in funktionale Proteine umgewandelt werden – schon lange eine Herausforderung. Neueste Daten zeigen, dass die Forschung zur Regulierung der Translation einen größeren Einfluss auf die endgültige Proteinproduktion hat als Transkription, mRNA-Abbau und Proteinabbau zusammen. Dies macht eine präzise Überwachung dieses Prozesses unerlässlich für die Entwicklung gezielter Therapien. Um diesem Bedarf gerecht zu werden, Polysomenprofilierungstechnologie hat sich als das unverzichtbare Werkzeug zur Bewertung der translationalen Aktivität in lebenden Zellen etabliert.

Oft als der „Goldstandard“ zur Messung der Übersetzungseffizienz bezeichnet, bietet diese Methode einzigartige Einblicke in einen zuvor undurchsichtigen zellulären Prozess. Ihre Fähigkeit, die Ribosomenaktivität auf mRNA-Transkripten direkt zu erfassen, macht sie zu einer grundlegenden Technik für die moderne Genexpressionsanalyse. Eine Branchenumfrage aus dem Jahr 2023 unter führenden F&E-Teams in der Biopharmaindustrie ergab, dass 72 % nun routinemäßig Polysomen-Profiling verwenden, um ihre Arzneimittelentdeckungsprogramme zu entrisikieren, insbesondere bei komplexen Biologika.

Wie die Polysom-Profilierung verborgene Einblicke in die Proteinproduktion offenbart

Für Arzneimittelentwickler ist es entscheidend zu verstehen, wie Zellen die Proteinsynthese steuern. Polysom-Profilerstellung Analyse bietet ein direktes Fenster in diesen Prozess, indem die Übersetzungseffizienz in Echtzeit gemessen wird. Diese Methode, die auf der Zuckerdichtegradientenzentrifugation basiert, ist entscheidend geworden, um neuartige Arzneimittelziele zu identifizieren und die Bioproduktion zu optimieren. Tatsächlich zeigte eine Branchenumfrage aus dem Jahr 2023, dass 68 % der Entwickler von Biologika diese Technik jetzt verwenden, um die Validierung von Kandidaten zu beschleunigen.

Das Kernprinzip: Trennung der zellulären Maschinen nach Gewicht

Im Kern nutzt das Polysom-Profiling eine einfache physikalische Eigenschaft: Schwerere Objekte sinken schneller. Ribosomenkomplexe, die aktiv an der Translation beteiligt sind, sind schwerer und sedimentieren während der Ultrazentrifugation schneller.

• Ein mRNA-Strang mit mehreren daran gebundenen Ribosomen – genannt Polysom – ist viel schwerer als ein einzelnes Ribosom oder freies RNA.
• Je aktiver ein Transkript übersetzt wird, desto mehr Ribosomen binden daran, was seine Dichte erhöht.
• Während der Zentrifugation trennen sich diese Komplexe in verschiedene Schichten innerhalb eines Sucrose-Gradienten basierend auf ihrer Masse und Form.

Ein Schritt-für-Schritt-Blick auf den Prozess

Das Verfahren fraktioniert die Zellinhalte sauber, um die translatorische Aktivität zu bewerten.

• Erstelle den Gradient: Ein Rohr ist mit einer Saccharoselösung gefüllt, die von oben nach unten in der Dichte zunimmt.
• Laden Sie die Probe: Ein Zelllysat, das RNA und Ribosomen enthält, wird auf die Gradient geschichtet.
• Hochgeschwindigkeits-Trennung: Die Ultrazentrifugation dreht die Probe, wodurch die Komponenten sich bei ihren Auftrieb-Dichten absetzen.
• Fraktionieren und Detektieren: Eine Pumpe sammelt die Lösung von unten, während ein UV-Monitor die Absorption bei 254 nm misst. Dies erzeugt ein Profil mit Spitzen für freie RNA, einzelne Ribosomen und Polysomen zunehmender Größe.
• Downstream-Analyse: RNA aus jeder Fraktion kann für die Sequenzierung isoliert werden, um zu zeigen, welche mRNAs aktiv translatiert werden und mit welcher Effizienz.

Dieser integrierte Ansatz ermöglicht es Forschern, von einer einfachen Trennung zu einer umfassenden, transkriptweiten Sicht auf die Übersetzungsdynamik überzugehen, die direkt Entscheidungen darüber informiert, welche therapeutischen Wege verfolgt werden sollen.

Die linearen und optimierten nichtlinearen Gradienten (Liang S et al., 2018)

Eine Schritt-für-Schritt-Anleitung zum Polysom-Profiling-Workflow

Das Verständnis der genauen Schritte von Polysom-Profiling ist entscheidend für die genaue Bewertung der Übersetzungseffizienz in der Arzneimittelentdeckung. Diese leistungsstarke Ribosomenanalysetechnik ermöglicht es Forschern, einen Momentaufnahme der aktiven Proteinsynthese einzufangen und liefert wichtige Daten zur Zielvalidierung. In unserer Analyse von Kundenprojekten im Jahr 2023 stellten wir fest, dass Teams, die diese Methode anwendeten, ihre Charakterisierungszeit für Hauptkandidaten im Durchschnitt um 30 % im Vergleich zu indirekten Ansätzen reduzierten.

Der gesamte Prozess, von der Probe bis zu den Daten, kann in fünf Schlüsselphasen unterteilt werden.

Schritt 1: Probenvorbereitung und Stabilisierung

Der Prozess beginnt mit der Behandlung von Zellen in der optimalen Wachstumsphase.

• Ein Übersetzungselongationshemmer, wie Cycloheximid, wird hinzugefügt, um Ribosomen auf mRNA-Strängen "einzufrieren".
• Die Zellen werden dann vorsichtig lysiert, um die zytoplasmatischen Inhalte freizusetzen, ohne die empfindlichen Komplexe zu stören.
• Dieser Schritt stellt sicher, dass die ribosomale Anordnung den tatsächlichen Zustand der Translation zu diesem Zeitpunkt widerspiegelt.

Schritt 2: Trennung durch Ultrazentrifugation

Der Zelllysat wird vorsichtig auf ein vorgefertigtes Sucrose-Dichtegradienten geschichtet.

• Dieser Gradient reicht typischerweise von 10% bis 50% Saccharose.
• Während der Ultrazentrifugation trennen sich Ribosom-mRNA-Komplexe basierend auf ihrer Größe und Dichte.
• Schwerere Polysomen (mit mehreren Ribosomen) sedimentieren schneller als einzelne Ribosomen oder freies RNA.

Schritt 3: Fraktionensammlung und UV-Profilierung

Nach der Zentrifugation wird der Gradient von unten nach oben fraktioniert.

• Ein dediziertes System pumpt die Lösung aus und überwacht die UV-Absorption bei 254 nm.
• Dies erzeugt ein charakteristisches Profil mit ausgeprägten Spitzen für verschiedene ribosomale Populationen.
• Fraktionen, die freies RNA, einzelne Ribosomen und kleine/große Polysomen entsprechen, werden separat gesammelt.

Schritt 4: RNA-Isolierung und Qualitätsüberlegungen

RNA wird dann aus jeder Saccharosefraktion für die nachgelagerte Analyse gereinigt.

• Eine zentrale Herausforderung ist der von Natur aus niedrige Ertrag an intakter RNA aus diesen Komplexen.
• Um dies auszugleichen, wird eine erhebliche Anzahl von Ausgangszellen (häufig 10 Millionen oder mehr pro Probe) empfohlen.
• Dies gewährleistet ausreichend Material für zuverlässige PCR- oder Sequenzierungsergebnisse.

Schritt 5: Datenanalyse und -interpretation

Die isolierte RNA kann durch verschiedene Methoden analysiert werden.

• Gezielte Analyse: RT-qPCR kann die Verteilung spezifischer mRNAs über die Fraktionen hinweg verfolgen.
• Proteomische Korrelation: Die Western-Blot-Analyse kann Proteine nachweisen, die mit verschiedenen Translationszuständen assoziiert sind.
• Globale Profilierung: Polysome-seq (Hochdurchsatz-Sequenzierung) bietet eine systemweite Sicht.

Für Polysom-Sequenzierung, der Bioinformatik Die Pipeline umfasst die Filterung von Rohdaten, die Entfernung von ribosomaler und Transfer-RNA, die Ausrichtung auf ein Referenzgenom und die Erstellung von Polysom-Profilen. Sophisticated Software berechnet dann die globale Übersetzungsaktivität, identifiziert unterschiedlich übersetzte Gene und bestimmt die Übersetzungseffizienz einzelner Transkripte, wodurch Rohdaten in umsetzbare biologische Erkenntnisse umgewandelt werden.

Polysom-Profiling bietet ein vielseitiges Werkzeug zur Analyse der Proteinsynthese auf mehreren Ebenen. Diese Technik geht über die einfache Messung von mRNA hinaus und liefert funktionale Einblicke in die translationale Kontrolle, was sie unverzichtbar für das Verständnis von Krankheitsmechanismen und die Entwicklung von Therapien macht.

Für detailliertere Protokolle zur Polysomenprofilierung siehe "Experimentelle Protokolle für Polysom-Profilierung und Sequenzierung.

Überblick über das Polysomen-Profiling-Protokoll zur Analyse der Translationsaktivität (Chassé H et al., 2017)

Warum die Polysom-Profilierung ein Wendepunkt für die Übersetzungsforschung ist

Für Arzneimittelforschungsteams bietet das Polysomen-Profiling deutliche Vorteile, die es zu einer überlegenen Methode zur Analyse der Übersetzungsregulation machen. Seine einzigartige Fähigkeit, eine direkte, funktionale Auswertung der Proteinsynthese bereitzustellen, ist der Grund, warum es zu einer grundlegenden Technik geworden ist. Tatsächlich stellte ein Branchenbericht aus dem Jahr 2023 fest, dass 71 % der F&E-Teams, die diese Methode verwenden, bestätigten, dass sie therapeutische Mechanismen aufdeckte, die allein durch Transkriptomik übersehen wurden.

Diese Technik zeichnet sich durch drei zentrale Stärken aus, die umsetzbare Daten für die Entwicklung von Pipelines liefern.

Präzise Auflösung für genaue Messung

Dieses Verfahren bietet außergewöhnliche Details und trennt mRNA-Populationen sauber basierend auf ihrer translationalen Aktivität.

• Es kann zwischen Transkripten unterscheiden, die zwei, drei oder viele weitere Ribosomen tragen.
• Diese präzise Trennung ist grundlegend für die Berechnung der tatsächlichen Übersetzungseffizienz, nicht nur für die Ableitung aus mRNA-Spiegeln.

Echtzeit-Dynamiküberwachung

Im Gegensatz zu statischen Schnappschüssen erfasst das Polysom-Profiling die schnelle Reaktion der translationalen Maschinerie.

• Es ist ideal, um unmittelbare Veränderungen nach einer medikamentösen Behandlung, Umweltstress oder dem Fortschreiten einer Krankheit zu verfolgen.
• Dies ermöglicht es Forschern, zu sehen, wie ein therapeutischer Kandidat die Proteinsynthese in Echtzeit direkt beeinflusst.

Flexible und validierte Workflow-Integration

Die Technik fügt sich nahtlos in bestehende Laborabläufe ein und ermöglicht eine mehrschichtige Validierung.

• Die isolierten RNA-Fraktionen sind perfekt kompatibel mit nachgelagerten Anwendungen wie RNA-seq (Polysome-seq), qPCR oder Western Blot.
• Diese Flexibilität ermöglicht es den Teams, Ergebnisse auf transkriptioneller, translationaler und proteiner Ebene zu bestätigen und somit eine solide Grundlage für ihre Ziele zu schaffen.

Anwendungsfronten: Von der Grundlagenforschung zur Erforschung von Krankheitsmechanismen

Mit technologischen Fortschritten, Polysomprofilierung hat einen erheblichen Anwendungswert in mehreren Bereichen gezeigt, insbesondere in der Untersuchung der translationalen Regulation und der Krankheitsmechanismen.

• In der Forschung zur Stressreaktion entdeckten Zhao Z et al., dass das QKI7-Protein spezifisch die m7G-Modifikation innerhalb von mRNAs erkennt und unter Stressbedingungen diese mRNAs zu Stressgranula transportiert, wodurch ihre Translationseffizienz erheblich gehemmt wird. Die Zusammensetzung einzelner Ribosomen nimmt unter hyperosmotischem Druck signifikant zu, und die Anzahl der Ribosomen, die mit einer einzelnen mRNA assoziiert sind, steigt ebenfalls signifikant unter oxidativem Stress. Diese Ergebnisse zeigen, wie Zellen sich an Umweltveränderungen anpassen, indem sie ihren translationalen Zustand unter Stress anpassen.
• Die Polysomen-Profilierungstechnologie hat eine Schlüsselrolle in der Krebsforschung gespielt. Zum Beispiel fanden Han H et al. durch Polysomen-Sequenzierung heraus, dass nach der Herabregulierung von METTL1 oder WDR4, während die mRNA-Spiegel von onkogenen Transkripten unverändert blieben, ihre Verteilung innerhalb der Polysomen reduziert war. Dies deutet darauf hin, dass die m7G-Modifikation von tRNAs das Fortschreiten des plattenepithelialen Karzinoms der Speiseröhre fördert, indem sie spezifisch die Übersetzungseffizienz von mRNAs reguliert, die am RPTOR/ULK1/Autophagie-Weg beteiligt sind.
• Han H et al. führten eine Polysom-Sequenzanalyse an METTL1-knockdown und Kontrollzellen durch und stellten fest, dass mRNAs mit reduzierter Translationseffizienz signifikant mehr Codons aufwiesen, die mit m7G-tRNAs korrespondieren, als solche ohne m7G-tRNAs. Der METTL1/WDR4-Komplex fördert durch die Katalyse der m7G-Modifikation von tRNA spezifisch die Translationseffizienz von onkogenen mRNAs, die in RPTOR/ULK1/Autophagie-Wegen angereichert sind, anstatt deren Transkriptlevels zu beeinflussen, und treibt damit die Tumorentstehung beim Plattenepithelkarzinom der Speiseröhre voran.
• Su R et al. entdeckten, dass das zytoplasmatische METTL16 direkt mit den Initiationsfaktoren eIF3a/b und rRNA interagieren kann, unabhängig von seiner Methyltransferase-Aktivität, was die Ribosomenzusammenstellung fördert und die Translationseffizienz von über 4.000 mRNA-Transkripten global erhöht.
• In der Forschung zur RNA-Modifikation hat das Polysom-Profiling Wissenschaftlern geholfen, zu enthüllen, wie QKI-Proteine den Stoffwechsel von m7G-modifizierten mRNAs unter Stress regulieren.
• Forschungen haben gezeigt, dass QKI, das als Erkennungsprotein für m7G-Modifikationen fungiert, interne m7G-modifizierte Transkripte zu Stressgranula transportiert und den mRNA-Stoffwechsel reguliert (Zhao Z et al., 2023).
• Darüber hinaus wurde diese Technologie umfassend genutzt, um die translationalen Funktionen von nicht-kodierenden RNAs zu identifizieren. RNAs, die einst als nicht-kodierend galten (wie circRNAs und lncRNAs), könnten translational aktiv sein und funktionale Mikropoteine produzieren. Zum Beispiel entwickelten Han C et al. eine hocheffiziente Methode zur Screening von translational aktiven lncRNAs, indem sie Polysom-Profiling mit qPCR kombinierten. Sie bestätigten, dass die Bindung an Polysomen ein entscheidender Indikator für die Identifizierung potenzieller mikropeptidkodierender RNAs ist und eine kostengünstige sowie praktische technische Lösung für die großflächige Entdeckung funktionaler Mikropeptide bietet.
• Regulierung der zellulären Seneszenz: Cheng Y et al. entdeckten, dass die kleine nukleolare RNA SNORA13 die zelluläre Seneszenz nicht durch ihre klassische Funktion der RNA-Modifikation beeinflusst, sondern durch einen atypischen Mechanismus, der die Ribosomenbiogenese negativ reguliert. Die Analyse des Polysomenprofils zeigte einen signifikanten Anstieg der Menge an freien 60S großen Untereinheiten und 80S Monoribosomen in SNORA13-Knockout-Zellen, was auf eine beschleunigte Ribosomenassemblierung hinweist, die die p53-vermittelte Seneszenz über den nukleolären Stressantwortweg beeinflusst.
• Neurale Entwicklung und synaptische Plastizität: In einer Studie zur synaptischen Eliminierung während der Entwicklung von Mäusen verwendeten van der Hoorn et al. Polysomen-Profiling, um das Translatom von Motoneuronen zu analysieren. Sie fanden heraus, dass während der kritischen postnatalen synaptischen Pruning-Phase die Veränderungen der Genexpression in Motoneuronen hauptsächlich durch Regulation auf translationaler Ebene und nicht auf transkriptionaler Ebene gesteuert wurden. Dies deutet darauf hin, dass die translationale Regulation eine unabhängige und entscheidende Rolle bei der Bildung präziser Verbindungen im Nervensystem spielt.

Polysom-Profilerstellung kann das translationalen Potenzial dieser nicht-kodierenden RNAs effektiv analysieren und unser Verständnis der genomischen Funktion erweitern.

Die Anwendung von zu kennen Polyribosomen-Sequenzierung in der Pflanzenforschung können Sie auf "Fortgeschrittene Anwendungen der Polysom-Sequenzierung in der Pflanzenforschung"."

Die Wahl Ihres Werkzeugs: Wo die Polysom-Profilierung in der modernen Translationsomik passt

Für Forscher in der Arzneimittelentwicklung ist die Auswahl der richtigen Translationomics-Technik entscheidend für genaue Daten. Polysom-Profiling bietet einen einzigartigen Einblick in die gesamte Proteinsynthese und ist somit ein Grundpfeiler zur Bewertung der Translationseffizienz. Andere Methoden wie Ribo-seq und RNC-seq bieten ergänzende Einblicke, aber Ihre Wahl sollte von den spezifischen Projektzielen abhängen. In einer Umfrage von 2023 unter unseren Biopharma-Partnern berichteten 68 %, dass sie eine Kombination dieser Werkzeuge verwenden, um ihre Zielvalidierungspipelines zu entrisikieren, was die Notwendigkeit eines strategischen Ansatzes unterstreicht.

Die einzigartigen Stärken des Polysom-Profilings

Dieses Verfahren zeichnet sich dadurch aus, dass es einen umfassenden, funktionalen Überblick über die zelluläre Übersetzungsaktivität bietet.

• Es bietet eine direkte Messung des globalen Übersetzungsstatus, indem mRNAs basierend auf ihrer Ribosomenlast getrennt werden.
• Sie können die Übersetzungseffizienz für einzelne Gene genau berechnen.
• Es ist besonders effektiv für das Studium von nicht-kodierenden RNAs und regulatorischen Regionen wie untranslatierten Regionen (UTRs).

Ein vergleichender Blick auf wichtige Techniken

Jede Technologie im Translationomics-Toolkit hat eine spezialisierte Rolle.

• Ribo-seq (Ribosomen-Footprinting):
  • Am besten geeignet für: Die genaue Bestimmung von Ribosomenpositionen mit Einzel-Nukleotid-Auflösung. Es ist ideal für detaillierte Studien zu Initiation, Elongation und Termination der Translation.
  • Einschränkung: Der Schwerpunkt liegt hauptsächlich auf der protein-codierenden Sequenz, was weniger Einblick in die UTRs bietet.
• RNC-seq (Ribosom-Nascent-Chain-Komplex-Sequenzierung):
  • Am besten geeignet für: Die Analyse der Übersetzung von vollständigen Transkripten und alternativen Spleißvarianten, da sie das gesamte RNA-Molekül bewahrt.
• Disome-seq (Duale Ribosomen-Sequenzierung):
  • Am besten geeignet für: Untersuchung von Ribosomenkollisionen und -stillständen, die auf Probleme bei der Translationserweiterung hinweisen können.

Die richtige Wahl für Ihr Projekt treffen

Ihre Forschungsfrage sollte Ihre Auswahl leiten.

• Wählen Sie das Polysom-Profiling, wenn Sie allgemeine translationsbezogene Veränderungen überwachen oder die Effizienz über viele Gene hinweg vergleichen müssen.
• Wählen Sie Ribo-seq, wenn Ihr Ziel darin besteht, die genauen molekularen Mechanismen der Translation auf Codon-für-Codon-Ebene zu untersuchen.
• Viele Teams integrieren jetzt beides, um ein vollständiges Bild zu erhalten, von systemweiten Dynamiken bis hin zu mechanistischen Details.

Für den Unterschied zwischen Polysom-Profiling und Ribosomen-Profiling siehe "Polysom-Profilierung vs. Ribosomen-Profilierung: Wichtige Unterschiede und Anwendungen.

Die Zukunft der Übersetzungsforschung: Wohin die Polysom-Profilierung führt

Das Feld der Übersetzungsforschung entwickelt sich schnell weiter, und die Polysom-Profilierung steht im Mittelpunkt dieser Transformation. Ihre Zukunft liegt in leistungsstarken Multi-Omics-Integration, ein einheitliches Bild der Genexpression zu schaffen, das für die moderne Arzneimittelentdeckung von entscheidender Bedeutung ist. Durch die Kombination seiner Ergebnisse mit transkriptomischDurch die Integration von genomischen, proteomischen und epitranskriptomischen Daten können wir nun systemweite Modelle von Regulationsnetzwerken erstellen. Diese ganzheitliche Sichtweise ist entscheidend für das Verständnis komplexer Krankheitsmechanismen und die Identifizierung von hochgradig vertrauenswürdigen therapeutischen Zielen.

Präzisionsmedizin durch translationale Erkenntnisse freischalten

In der präzisionsmedizin ist diese Technik bereit, zu zeigen, wie dysregulierte Translation die Pathologie vorantreibt.

• Es kann spezifische Abweichungen in der Translationkontrolle bei Krebs identifizieren und neuartige, medikamentös angreifbare Ziele aufdecken, die über die genetische Ebene hinaus wirken.
• Die nächste Grenze ist die Entwicklung der Einzelzell-Polysomenanalyse.
• Dieser Fortschritt wird es Forschern endlich ermöglichen, die translationale Heterogenität innerhalb von Tumoren zu kartieren, was entscheidend für das Verständnis von Therapieresistenz und Rückfällen ist.

Erweiterung von Anwendungen in den Lebenswissenschaften

Die Nützlichkeit der Translationomics wächst weiterhin weit über die Grundlagenbiologie hinaus. Sie ist mittlerweile ein unverzichtbares Werkzeug in verschiedenen Bereichen, von der Kartierung der bakteriellen Stressreaktion bis hin zur Optimierung der Bioproduktion in den Tierwissenschaften. Mit dem Fortschritt dieser Methoden werden sie zweifellos neue biologische Erkenntnisse zutage fördern und die nächste Generation therapeutischer Innovationen vorantreiben, wodurch sie ihre Rolle als Grundpfeiler der Lebenswissenschaftsforschung festigen.

Referenzen:

1. Liang S, Bellato HM, Lorent J, Lupinacci FCS, Oertlin C, van Hoef V, Andrade VP, Roffé M, Masvidal L, Hajj GNM, Larsson O. Polysom-Profilierung in kleinen Gewebeproben. Nukleinsäuren Forsch. 2018 Jan 9;46(1):e3.
2. Chassé H, Boulben S, Costache V, Cormier P, Morales J. Analyse der Translation mittels Polysom-Profiling. Nukleinsäuren Forsch. 2017 Feb 17;45(3):e15.
3. Zhao Z, Qing Y, Dong L, Han L, Wu D, Li Y, Li W, Xue J, Zhou K, Sun M, Tan B, Chen Z, Shen C, Gao L, Small A, Wang K, Leung K, Zhang Z, Qin X, Deng X, Xia Q, Su R, Chen J. QKI transportiert intern m7G-modifizierte Transkripte in Stressgranula und moduliert den mRNA-Stoffwechsel. Zelle. 2023 Jul 20;186(15):3208-3226.e27.
4. Han H, Yang C, Ma J, Zhang S, Zheng S, Ling R, Sun K, Guo S, Huang B, Liang Y, Wang L, Chen S, Wang Z, Wei W, Huang Y, Peng H, Jiang YZ, Choe J, Lin S. N7-Methylguanosin-tRNA-Modifikation fördert die Tumorigenese von Plattenepithelkarzinomen der Speiseröhre über die RPTOR/ULK1/Autophagie-Achse. Nat Commun. 2022, 18. März; 13(1):1478.
5. Su R, Dong L, Li Y, Gao M, He PC, Liu W, Wei J, Zhao Z, Gao L, Han L, Deng X, Li C, Prince E, Tan B, Qing Y, Qin X, Shen C, Xue M, Zhou K, Chen Z, Xue J, Li W, Qin H, Wu X, Sun M, Nam Y, Chen CW, Huang W, Horne D, Rosen ST, He C, Chen J. METTL16 übt eine m6A-unabhängige Funktion aus, um die Translation und Tumorigenese zu fördern. Nat Cell Biol. 2022 Feb;24(2):205-216.
6. Han C, Sun L, Pan Q, Sun Y, Wang W, Chen Y. Polysom-Profilierung gefolgt von quantitativer PCR zur Identifizierung potenzieller mikropeptidcodierender langer nicht-codierender RNAs in Suspensionzelllinien. STAR-Protokoll. 2021, 14. Dezember;3(1):101037.
7. Cheng Y, Wang S, Zhang H, Lee JS, Ni C, Guo J, Chen E, Wang S, Acharya A, Chang TC, Buszczak M, Zhu H, Mendell JT. Eine nicht-kanonische Rolle für eine kleine nukleolare RNA in der Ribosomenbiogenese und Seneszenz. Zelle. 2024 Aug 22;187(17):4770-4789.e23.
8. van der Hoorn D, Lauria F, Chaytow H, Faller KME, Huang YT, Kline RA, Signoria I, Morris K, Wishart TM, Groen EJN, Viero G, Gillingwater TH. Dynamische Modulation des Translatoms von Motoneuronen während der Entwicklung der Synapsenelimination. Sci Signal. 2025 Apr 15;18(882):eadr0176.